FG beadsを用いて、抗原と抗体の特異的な結合により沈降する免疫沈降反応を利用することで、抗原や抗体の検出・分離・精製など幅広い分野への応用が可能です。
抗体をビーズ上へアフィニティまたは共有結合で固定化する。
※横スクロールしてご覧ください
タンパク質のNH2基へ固定化 | アフィニティ結合で固定化 | Avidin-biotin結合で固定化 | タンパク質のSH基、NH2基へ固定化 | タンパク質の His-tagへ固定化 |
クリックケミストリーで固定化 | |
---|---|---|---|---|---|---|
共有結合で強固に固定化。タンパク質上のNH2基にランダムに固定化されるため抗体の配向がバラバラ。COOH beadsよりも、固定化操作が簡単なNHS beadsがオススメ。 | 抗体のみ固定化が可能。アフィニティによって結合。抗体の配向が揃い、簡単に固定化ができる。 | 強力なアフィニティ結合で固定化。biotin化が必要。 | 安価なビーズで固定化が可能。但し、37℃でのタンパク質の温度耐性が必要。 | タンパク質へのHis-tagの導入が必要で、タンパク質上のNH2基とも結合する。 | 共有結合で強固に固定化が可能。AzideやAlkyneの導入や有機溶媒耐性が必要。 | |
(1)抗体 固定化 |
◎ | ◎ | ◎ | ○ | ○ | △ |
推奨 ビーズ |
COOH beadsNHS beads | Protein A beadsProtein G beads | Streptavidin beadsNeutrAvidin beads | Epoxy beads | Ts beads | Azide beadsAlkyne beads |
◎:推奨 ○:可能 △:条件次第で可能 ×:利用不可
抗原をビーズ上へ共有結合で固定化する。
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タンパク質のNH2基へ固定化 | アフィニティ結合で固定化 | Avidin-biotin結合で固定化 | タンパク質のSH基、NH2基へ固定化 | タンパク質の His-tagへ固定化 |
クリックケミストリーで固定化 | |
---|---|---|---|---|---|---|
共有結合で強固に固定化。タンパク質上のNH2基にランダムに固定化されるため抗体の配向がバラバラ。COOH beadsよりも、固定化操作が簡単なNHS beadsがオススメ。 | 抗体のみ固定化が可能。アフィニティによって結合。抗体の配向が揃い、簡単に固定化ができる。 | 強力なアフィニティ結合で固定化。biotin化が必要。 | 安価なビーズで固定化が可能。但し、37℃でのタンパク質の温度耐性が必要。 | タンパク質へのHis-tagの導入が必要で、タンパク質上のNH2基とも結合する。 | 共有結合で強固に固定化が可能。AzideやAlkyneの導入や有機溶媒耐性が必要。 | |
(2)抗原 固定化 |
◎ | × | ◎ | ○ | ○ | △ |
推奨 ビーズ |
COOH beadsNHS beads | Protein A beadsProtein G beads | Streptavidin beadsNeutrAvidin beads | Epoxy beads | Ts beads | Azide beadsAlkyne beads |
◎:推奨 ○:可能 △:条件次第で可能 ×:利用不可
ビーズ上へ抗体(または抗原)を固定化した後に、標的抗原(または抗体)を回収(結合)する。
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タンパク質のNH2基へ固定化 | アフィニティ結合で固定化 | Avidin-biotin結合で固定化 | タンパク質のSH基、NH2基へ固定化 | タンパク質の His-tagへ固定化 |
クリックケミストリーで固定化 | |
---|---|---|---|---|---|---|
共有結合で強固に固定化。タンパク質上のNH2基にランダムに固定化されるため抗体の配向がバラバラ。COOH beadsよりも、固定化操作が簡単なNHS beadsがオススメ。 | 抗体のみ固定化が可能。アフィニティによって結合。抗体の配向が揃い、簡単に固定化ができる。 | 強力なアフィニティ結合で固定化。biotin化が必要。 | 安価なビーズで固定化が可能。但し、37℃でのタンパク質の温度耐性が必要。 | タンパク質へのHis-tagの導入が必要で、タンパク質上のNH2基とも結合する。 | 共有結合で強固に固定化が可能。AzideやAlkyneの導入や有機溶媒耐性が必要。 | |
(3)直接法 | ◎ | ◎ | ◎ | ○ | ○ | △ |
推奨 ビーズ |
COOH beadsNHS beads | Protein A beadsProtein G beads | Streptavidin beadsNeutrAvidin beads | Epoxy beads | Ts beads | Azide beadsAlkyne beads |
◎:推奨 ○:可能 △:条件次第で可能 ×:利用不可
抗原抗体反応を行った後に、ビーズにて抗原・抗体複合体を回収する。
※横スクロールしてご覧ください
タンパク質のNH2基へ固定化 | アフィニティ結合で固定化 | Avidin-biotin結合で固定化 | タンパク質のSH基、NH2基へ固定化 | タンパク質の His-tagへ固定化 |
クリックケミストリーで固定化 | |
---|---|---|---|---|---|---|
共有結合で強固に固定化。タンパク質上のNH2基にランダムに固定化されるため抗体の配向がバラバラ。COOH beadsよりも、固定化操作が簡単なNHS beadsがオススメ。 | 抗体のみ固定化が可能。アフィニティによって結合。抗体の配向が揃い、簡単に固定化ができる。 | 強力なアフィニティ結合で固定化。biotin化が必要。 | 安価なビーズで固定化が可能。但し、37℃でのタンパク質の温度耐性が必要。 | タンパク質へのHis-tagの導入が必要で、タンパク質上のNH2基とも結合する。 | 共有結合で強固に固定化が可能。AzideやAlkyneの導入や有機溶媒耐性が必要。 | |
(4)間接法 | × | △ | ◎ | × | ○ | △ |
推奨 ビーズ |
COOH beadsNHS beads | Protein A beadsProtein G beads | Streptavidin beadsNeutrAvidin beads | Epoxy beads | Ts beads | Azide beadsAlkyne beads |
◎:推奨 ○:可能 △:条件次第で可能 ×:利用不可
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タンパク質のNH2基へ固定化 | アフィニティ結合で固定化 | Avidin-biotin結合で固定化 | タンパク質のSH基、NH2基へ固定化 | タンパク質の His-tagへ固定化 |
クリックケミストリーで固定化 | |
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共有結合で強固に固定化。タンパク質上のNH2基にランダムに固定化されるため抗体の配向がバラバラ。COOH beadsよりも、固定化操作が簡単なNHS beadsがオススメ。 | 抗体のみ固定化が可能。アフィニティによって結合。抗体の配向が揃い、簡単に固定化ができる。 | 強力なアフィニティ結合で固定化。biotin化が必要。 | 安価なビーズで固定化が可能。但し、37℃でのタンパク質の温度耐性が必要。 | タンパク質へのHis-tagの導入が必要で、タンパク質上のNH2基とも結合する。 | 共有結合で強固に固定化が可能。AzideやAlkyneの導入や有機溶媒耐性が必要。 | |
(1)抗体 固定化 |
◎ | ◎ | ◎ | ○ | ○ | △ |
(2)抗原 固定化 |
◎ | × | ◎ | ○ | ○ | △ |
(3)直接法 | ◎ | ◎ | ◎ | ○ | ○ | △ |
(4)間接法 | × | △ | ◎ | × | ○ | △ |
推奨 ビーズ |
COOH beadsNHS beads | Protein A beadsProtein G beads | Streptavidin beadsNeutrAvidin beads | Epoxy beads | Ts beads | Azide beadsAlkyne beads |
◎:推奨 ○:可能 △:条件次第で可能 ×:利用不可
免疫沈降(1)
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免疫沈降(2)
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免疫沈降(3)
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免疫沈降(4)
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ユーザーボイス ‐北海道大学 小原圭介先生
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東京医科大学 山本淳一先生
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Houston Methodist Research Institute Weill Cornell Medical College 堀越信夫先生
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